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尼康顯微鏡觀察技巧
尼康顯微鏡是一種主要用于測量和測量的顯微鏡。它不同于其他顯微鏡。尼康顯微鏡在工作臺(tái)上運(yùn)行非常jing確,并有一些特殊的目鏡,用于平面甚至三維數(shù)據(jù)的測量。采用物鏡朝上的設(shè)計(jì)以便從標(biāo)本的下方可以進(jìn)行管理觀察,因此被廣泛地應(yīng)用于各種生物醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)室,用于查看培養(yǎng)具有細(xì)胞的生長發(fā)展?fàn)顟B(tài),熒光蛋白的表達(dá)情況等,為了滿足此領(lǐng)域多樣性的研究手段,需要倒置顯微鏡具備各種觀察方式,實(shí)驗(yàn)室有限的空間需要緊湊的機(jī)身設(shè)計(jì)同時(shí)具備出色的可操控性。
尼康顯微鏡的六大觀察技巧如下:
1.明視野觀察
光場顯微術(shù)是一種常見的顯微方法,廣泛應(yīng)用于病理學(xué)、染色切片的檢查和觀察。所有的顯微鏡都可以做到這一點(diǎn)。
2.暗視野觀察
暗視野檢查實(shí)際是暗場照明。它的特點(diǎn)和明視野進(jìn)行不同,不直接可以觀察到一個(gè)照明的光線,而觀察到的是被檢物體通過反射或衍射的光線。因此,視場為黑暗的背景,而被檢物體則呈現(xiàn)一個(gè)明亮的像。
暗場是基于光學(xué)威廉廷代爾現(xiàn)象,其中塵埃粒子通過直射光,不可見的人眼,因?yàn)楣馐茄苌?。若把光線空氣斜射它,由于光的反射,微粒之間似乎可以增大了體積,為人眼可見。暗場聚焦透鏡是暗場觀測的一種特殊附件。其特征是光束不能自下而上穿過被檢物體,但可以改變光束的發(fā)展路徑,使光束傾斜投射到被檢物體上,使照明環(huán)境光不直接經(jīng)濟(jì)地進(jìn)入物鏡,在被檢物體的材料表面產(chǎn)生由反射或衍射光形成的明亮圖像。暗場檢查的分辨率水平遠(yuǎn)高于明場觀察,可達(dá)0.02-0.004um
3.相差鏡檢法
在光學(xué)電子顯微鏡的發(fā)展和研究中,相差顯微鏡的發(fā)明獲得了成功,這是現(xiàn)代顯微鏡技術(shù)的重要成就。人眼只能分辨光波的波長(顏色)和振幅(亮度)。對于一個(gè)無色透明的生物組織標(biāo)本來說,當(dāng)光線通過時(shí),波長和振幅的恒定變化影響不大,因此很難在明視野下觀察標(biāo)本。
相位差顯微鏡是利用被檢物體的光程差進(jìn)行顯微檢查,即有效利用光的干涉現(xiàn)象,將人眼不可分辨的相位差變?yōu)榭煞直娴恼穹?,即使無色透明的物質(zhì)也能清晰可見。這極大地方便了對活組織和細(xì)胞的觀察,因此我們已經(jīng)廣泛地研究并將相差顯微鏡應(yīng)用于倒置顯微鏡。
4.微分干涉鏡檢術(shù)
20世紀(jì)60年代發(fā)展起來的差分干涉測量法,使用了一種特殊的伍拉斯頓棱鏡來分解光束。分離梁的振動(dòng)研究方向相互垂直,并且強(qiáng)度相等。光束在離我們很近的兩個(gè)不同點(diǎn)穿過被測物體,相位略有不同。由于兩束光的分裂距離極小,不存在重影現(xiàn)象,所以圖像數(shù)據(jù)呈現(xiàn)出立體的空間感。
5.霍夫曼調(diào)制相位對比
原理是利用斜光照射,將相位梯度轉(zhuǎn)化為光強(qiáng)的發(fā)展變化,這樣我們就可以直接管理和觀察未染色的樣品和活細(xì)胞。這種技術(shù)允許以三維方式觀察厚樣品。
6.塑料DIC
塑料DIC不同于其他普通的透射微分形式干涉顯微術(shù)(DIC)。它可以用這種特殊的環(huán)境光照射目標(biāo),不需要偏振光,所以聚光鏡一側(cè)沒有偏光鏡。光通過DIC棱鏡后會(huì)形成線偏振光,下一個(gè)檢偏器會(huì)透射在同一控制平面內(nèi)振動(dòng)的光,所以可以形成自己的干涉。
綜上所述就是尼康顯微鏡的觀察技巧,希望對您有所幫助,后續(xù)有任何需求可以聯(lián)系我們。
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